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在核酸分子中,由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系,因而具有独特的紫外线吸收光谱,一般在 260nm左右有最大吸收峰,可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。
(1)核酸的变性:在理化因素作用下, 核酸分子中的氢键断裂,双螺旋结构松散分开,形成无规则单链结构的过程。变性核酸将失去其部分或全部的生物活性。核酸的变性并不涉及磷酸二酯键的断裂,其一级结构(碱基顺序)保持不变。
A型题:
DNA变性的原因是()
A.3’,5’磷酸二酯键的断裂
B.二硫键的断裂
C.互补碱基之间氢键断裂
D.碱基甲基化修饰
E.多核苷酸链解聚
『正确答案』C
『答案解析』DNA变性是指在某些理化因素的作用下,互补的碱基对间的氢键断裂。
(2)DNA变性后,它的一系列性质也随之发生变化:
①增(高)色效应:天然状态的DNA在完全变性后,紫外吸收(260nm)值升高,即增色效应。
②Tm值: 随DNA变性增加,260nm处的紫外光吸收值逐渐增加,该值达到最大值50%时的温度称为核酸的解链温度或融解温度,用“Tm”表示。
Tm值影响因素: GC含量,GC含量越高,Tm值越大;核酸分子量,核酸分子量越大,Tm值也越大。
A型题:
『正确答案』B
『答案解析』DNA的变性从开始解链到完全解链,是在一个相当窄的温度范围内完成的,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时温度称为DNA的解链温度。
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